Исследование клеток гемопоэза представляет интерес, поскольку ни в одной другой ткани состояние клеточной поверхности не ответственно в такой степени за развертывание ряда явлений, происходящих в организме как в норме, так и при патологических состояниях.
Более глубокому изучению клеточной поверхности отдельных клеток и тканей в значительной степени способствовало внедрение в практику световой микроскопии. Которая
имеет большую глубину фокуса и сравнительно высокую разрешающую способность, что позволяет получить объемное изображение клеток и топографию их поверхности. Благодаря чему впервые удалось увидеть воочию клеточную поверхность и обнаружить, что она обладает определенным рельефом, образованным различного рода выростами - микроворсинками, складками, сферическими выбуханиями и т. п. Совокупность этих образований составляет топографию клеточной поверхности, являющуюся индивидуальной (для данного типа клеток) и вместе с тем весьма изменчивой характеристикой клетки. Данные позволили установить, что топография поверхности претерпевает существенные изменения при различных состояниях клетки, например при нахождении ее в различных фазах клеточного цикла или при трансформации клеток, при воздействии различных химических агентов и т. п. Другими словами, различные внутриклеточные процессы находят свое морфологическое отражение на поверхности клеток. Сейчас правомерно говорить о важном направлении в медицине - изучении морфологии (или топографии) клеточной поверхности. Современная модель кроветворения Схема кроветворения представляет собой строго формализованное отображение уровня знаний, достигнутых на момент ее создания. Как и прежде, современная схема кроветворения полностью соответствует предположению А. А. Максимова об унитарном происхождении всех клеток крови.
Изменения в схеме кроветворения затронули главным образом ее верхние этажи, классы стволовых клеток и коммитированных предшественников. Представления о классах морфологически распознаваемых кроветворных клеток основных восьми линий дифференцировки (эритроциты, тучные клетки - базофильные, нейтрофильные и эозинофильные гранулоциты, моноциты-макрофаги-остеокласты, мегакариоциты, В- и Т-лимфоциты) существенных изменений не претерпели.
Отношение числа клеток-предшественников в костном мозге к клеткам периферической крови остается постоянным всю жизнь. Исключительной особенностью крови как функциональной системы является то обстоятельство, что она объединяет работу многих физиологических систем организма. Кинетика кроветворения и кроверазрушения является важнейшим показателем качества работы функциональной системы крови. Этот показатель, с одной стороны, интегральный, а с другой - ключевой для понимания патогенеза воздействия различных экологических факторов на организм человека.
Естественно возникает вопрос о стабильности кроветворения, т. е. в каких пределах варьируют параметры нормального кроветворения, и где начинается патология? Для ответа на эти вопросы в нашем центре, с учетом собственных многолетних работ, были проанализированы данные литературы за последние 100 лет (гемограммы за 1890- 1998 гг., миелограммы за 1938-1998 гг. ). Согласно этим данным, количество эритроцитов, лейкоцитов гемоглобина и величина гематокрит, как у мужчин, так и у женщин характеризуется минимальной вариабельностью и за обзорный промежуток времени не претерпели каких-либо изменений. В показателях миелограммы за 60 лет существенных изменений также не произошло. Основными факторами, влияющими на кроветворение и обеспечивающими (мобильность, стабильность)
являются постоянная концентрация кислорода в окружающем воздухе, земная гравитация, микробное окружение, возможно, имеющаяся минимальная естественная радиация и другие геофизические условия.
«Консерватизм» кроветворения в масштабах организма необходим, так как этим обеспечивается совместимость гемопоэза с другими системами. В организме существует многоуровневый контроль совместимости, и уровни контроля совпадают с уровнями организации и самой системы.
Система гемопоэза, как и любая другая, состоит из множества взаимосвязанных звеньев. Каждый эффект системы дублируется несколькими звеньями: -
их переходом от покоя к активности, -
уровнем синтеза основных молекулярных продуктов -
способностью клеток воспринимать внешние молекулярные сигналы или сохранять резистентность к этим сигналам. Трудно представить, чтобы устойчивое изменение параметра системы гемопоэза длительно существовало без нарушения других систем. Еще труднее представить, чтобы это изменение закрепилось в потомстве, стало другим для индивидуума и для целой популяции. В этом случае должна произойти перестройка во многих системах организма, как правило, устойчивое отклонение параметра от эволюционно закрепившихся норм заканчивается гибелью организма.
Организм, не способный быстро восстанавливать гомеостаз после внешнего влияния, практически нежизнеспособен. Но и организм, вяло реагирующий на внешнее воздействие, практически не способен адаптироваться к изменяющимся условиям существования. Система гемопоэза реагирует на внешнее воздействие очень активно и быстро восстанавливает равновесие внутри себя, Таков «активный консерватизм» кроветворения, который обеспечивает положение данной системы как одной из важнейших и организме.
Общее строение клетки Все клетки организма человека имеют общий план строения. Плазматическая мембрана ограничивает клетку снаружи, внутри расположена протоплазма, в которой выделяют клеточное ядро и цитоплазму.
Клеточное ядро - наиболее крупное образование в клетке, играющее важнейшую функцию - хранение и передача генетической информации. От цитоплазмы, ядро отделено ядерной оболочкой, состоящей из внутренней и наружной мембран. В ядре содержатся хроматин, ядрышки и кариоплазма. Хроматин - комплекс белков и ДНК. Фибриллы хроматина могут располагаться рыхло, в результате чего в световой микроскоп виден диффузный хроматин (эухроматин). Кроме того, фибриллы могут собираться в отдельные глыбки, образуя плотный гетерохроматин. Основную массу ядрышек составляют РНК и белки. В этих структурах образуются рибосомы. Хроматин и ядрышки прикреплены к ядерной оболочке.
В цитоплазме располагаются различные органеллы - митохондрии, аппарат Гольджи, рибосомы, лизосомы, а также элементы цитоскелета - микротрубочки, микрофиламенты, филаменты.
Первостепенное значение поверхности в жизнедеятельности клетки определяется уже ее пространственным положением, поверхность образует пограничную зону между клеткой и внешней средой и первой встречает любой агент, действующий на клетку извне. От свойств поверхности зависит характер реакции клетки на этот агент. В общем поверхность следует рассматривать как часть клетки, контролирующую ее отношения с внешним миром.
Поверхность клетки представляет собой трехмерное образование, центральная и непременная часть поверхности это цитоплазматическая мембрана. Характерными компонентами мембраны являются липиды и белки. Результаты исследования строения мембраны хорошо согласуются с гипотезой, предложенной много лет назад. На основании косвенных данных клеточная мембрана состоит из бимолекулярного липидного слоя, по обеим краям которого находятся мономолекулярные белковые слои. С внешней стороны от мембраны располагается наружный или надмембранный компонент поверхности, который нельзя строго ограничить от слоя собственно мембраны. Характерным признаком этого слоя является наличие в его составе углеводных компонентов в виде олиго-и полисахаридов, обычно соединенных в той или иной форме с белками, липидами или пептидами. Размеры и характер надмембраннго слоя очень варьируют в зависимости от типа клеток. С наружным слоем поверхности связаны рецепторы - специализированные структурные участки или структуры поверхности, определяющие специфические реакции клетки с теми или иными внешними агентами, например с антителами.
Подмембранный компонент поверхности исследован значительно хуже, чем надмембранный и собственно мембраны. В этом слое располагаются сократительные белки, с которыми связаны движения поверхности. Световая микроскопия Применение в биологии и медицине имеет сравнительно короткую историю. Первые работы появились в конце 60-70-х годов. С этого времени количество работ стремительно увеличивается и полученные при помощи этого метода данные внесли существенный вклад в развитие новых представлений о строении клеток, органов и тканей. Благодаря разработкам методов подготовки биологических объектов, находит все более широкое применение при изучении проблем клеточной патологии. В настоящее время морфолог получает возможность проводить исследования не только описательного, но и аналитического характера, качественной и количественной оценки. Эти данные имеют как общее биологическое, так и клиническое значение, поскольку способствуют выяснению механизмов дифференциальной диагностики ряда заболеваний.
В медицине наиболее широко представлены исследования при изучении клеток крови больных. Как выяснилось из этих исследований и наших данных, эритроциты очень чувствительны к различным патологическим воздействиям и реагируют на них изменением размеров и форм дискоцитов. Данные об изменении форм эритроцитов имеют важное значение для диагностики. Состояние поверхности клеток крови ответственно за развертывание ряда явлений, происходящих в организме как в норме, так и при патологических состояниях (общая морфологическая структура гомеостаза, диапедез клеток, различные иммунологические реакции, тромбообразование и многое другое).
Важность методических аспектов в световой микроскопии определяется, динамичностью клеточных мембран и реактивностью поверхностных морфологических образований к внешним воздействиям, Поэтому необходимо строгое соблюдение определенных требований, предъявляемых каждой из стадий обработки, с тем Поверхность и конфигурация клеток периферической крови в норме Эритроциты Эритрон - система, объединяющая самые ранние предшественники эри-троидного ряда, морфологически идентифицируемые пропиферирующие и непролиферирующие ядерные клетки, ретикулоциты и эритроциты.
При продолжительности жизни эритроцита 120 дней костный мозг должен продуцировать в течение часа количество эритроцитов порядки 10×10. При этом для поддержания постоянного количества эритроцитов, циркулирующих в крови, такое же количество эритроцитов должно выводиться или разрушаться.
Давно предполагалось, что эритроцит является двояковогнутым диском. Однако четкое изображение эритроцита в таком виде было получено с помощью электронного микроскопа.
В циркуляторном русле эритроциты в силу своей эластичности принимают самую разнообразную конфигурацию, приспосабливаясь к форме сосуда или изменяясь под действием текущей плазмы. В связи с этим главными свойствами эритроцита являются способность к деформации и к образованию агрегатов. При нарушении агрегационных свойств эритроцитов нарушается их упорядоченность в кровеносном русле, превращая ламинарное течение в турбулентное.
Клетки в форме двояковогнутого диска имеют высокое соотношение площади поверхности к объему.
Форму диска эритроцит принимает под влиянием факторов, уменьшающих ограниченный объем. Среди этих факторов основным является работа калийнатриевого насоса. Выкачивая ионы из клетки, он обеспечивает компенсацию ионного баланса и снижает осмотическое давление, нормализует упругие свойства содержимого эритроцита. В большей степени важна высокая пластичность клеточной мембраны и непрерывная сеть монослоя белков, локализованная на внутренней поверхности цитоплазматической мембраны, состоящей из спектрин-актина. Изменение взаимодействия полипептидов в этой сети между собой и другими компонентами мембраны и другими компонентами мембраны может приводить к изменению свойств и формы эритроцитов.
Показано, что биохимические факторы, ведущие к сферичности (истощение АТФ, избыток Са, старение клетки), оказывают влияние на деформируемость посредством изменения формы в большей степени, чем в результате воздействия на мембранную эластичность. Известно, что изменение формы эритроцитов - энергетически-зависимый процесс. Угнетение метаболизма клетки, в частности уменьшение концентрации АТФ, вызывает повышение чувствительности эритроцитов к трансформирующим агентам. Так, например, альбумины способствуют стоматоцитарной трансформации, а гамма-глобулины - эхиноцитарной. Нагрузка Са вызывает полиморфные изменения, как мембран, так и субмембранных структур.
Изменение формы эритроцита на фоне истощения АТФ способствует появлению в плазме дисбаланса между стоматоцитарными и эхиноцитарными агентами, которые, соединяясь с мембранными структурами, вызывают перегруппировку или агрегацию мембранных белков, изменение фосфорилирования протеидов и изменение ионного равновесия, т. е. накопление Са благодаря угнетению Са АТФ-азы. При появлении противоположного по действию агента эритроцит снова может превращаться в диск. Выросты на мембране появляются при последовательных превращениях эритроцитов на строго определенных местах. Чувствительность к трансформирующим агентам возрастает в связи с уменьшением на поверхности мембраны слоя мукополисахсридов.
Выявлена высокая корреляция между содержанием холестерина в мембране и сосудистой стенке. Холестерин соединяется в мембране эритроцитов с фосфолипидами, откладываясь в виде холестериновых кластеров между листками мембраны и нарушает прежде всего функцию рецепторов и ферментов. Повышение содержания холестерина способствует уплощению дискоидной формы и сферуляции эритроцитов. При инкубации эритроцитов в среде, богатой холестерином, повышается соотношение холестерин/фосфолипиды с 0,9 до 1,8, деформабильность при этом снижается на 8%.
Поддержание постоянства уровня гемоглобина и количества эритроцитов в крови обеспечивается, как за счет выработки в организме специфических веществ, так и гормонов, стимулирующих или угнетающих эритропоэз. Гормоны, по-видимому, в значительной мере реализуют свое влияние на эритропоэз путем регуляции синтеза эритропоэтина. Ретикулоцит. По данным РЭМ, эта клетка больше эритроцита. Диаметр и толщина равны соответственно 7,8 и 1,7 мкм. Отношение диаметра и толщины (сферичность) для ретикулоцита равно 4,1, что
может означать, что существует тенденция к уплощению клетки. Поверхность ретикулоцита покрыта небольшими выемками и единичными ямками, которые зависят, по-видимому, от расположения внутри клетки органелл. При трансмиссионной электронной микроскопии показано, что ретикулоциты содержат части комплекса Гольджи, митохондрии и различное количество моно- и полирибосом. Дискоцит. В крови здоровых людей абсолютное большинство эритроцитов (до 97%) представляют собой дискоцитарные, с гладкой поверхностью, диаметром 6,5-8 мкм. Эти клетки принято называть дискоцитами. Клетка в форме двояковогнутого диска, вследствие чего при наблюдении под световым микроскопом его периферическая часть может казаться более темноокрашенной, чем центральная, размером 7-8 мкм. При скрининге эритроциты имеют розово-красный цвет. Дискоцит обладает высокой деформабильностью и эластичностью, что позволяет ему продвигаться как в крупных сосудах, так и в мелких капиллярах диаметром 3-5 мкм. Такая способность к изменению формы обусловлена метаболизмом этой клетки и может снижаться при различной патологии. Диаметр центральной впадины двояковогнутого диска обычно составляет 35-55% от целого диаметра клетки. Примерно 3% эритроцитов имеют в норме неправильную форму: эхиноцитарную, стоматоцитарную, куполообразную, сфероцитарную и т. д. Изменение формы эритроцитов может быть результатом нарушения внутриклеточного обмена или возникать вследствие внешних физико-химических и иммунологических воздействий, т. е. клетки могут подвергаться различным обратимым и необратимым трансформациям -
Эхиноцит. Хорошо известным примером обратимой деформации эритроцитов является переход от дискоцита к эхиноциту. Понимание механизмов деформации эритроцитов важно для представления о структурной организации и динамическом состоянии мембранных белков и липидов и факторах окружающей среды, которые могут влиять на свойства и целостность мембраны.
Когда эритроцит под покровное стекло для микроскопии, наблюдается изменение его формы: двояковогнутый диск покрывается выростами. Такой вид эритроцита получил название эхиноцита. Это обратимая форма, и если отмытые эритроциты поместить в нормальную свежую плазму они опять примут дискоидную форму.
В зависимости от степени выраженности выростов различают эхиноциты первого, второго и третьего порядков. Трансформация дискоцит - эхиноцит начинается с нарушения контура двояковогнутой структуры эритроцита с последующим появлением грубых вырастов сначала по окружности диска, а затем по всей поверхности клетки, после чего эритроцит принимает в основном сферическую форму. Выросты постепенно становятся тоньше и равномерно распределяются по клеточной поверхности в количестве от 30 до 50 на одну клетку. В конечной стадии при снижении метаболизма клетка теряет часть выростов, что фактически представляет собой потерю целых кусков мембраны; биохимически это можно установить по снижению мембранных липидов и часто следов гемоглобина. С потерей мембранного вещества трансформация становится необратимой - образуется сфероцит. Трансформация эхиноцита обратима до стадии потери мембранного вещества и не зависит от объема. Прогрессирующее снижение способности эхиноцитов к деформации происходит параллельно с уменьшением АТФ, накоплением кальция и изменением формы эхиноцита. Стоматоцит. Образование стоматоцита - это другой вариант трансформации эритроцита. Клетки становятся похожими на «открытый рот». Низкое рН и химические агенты вызывают появление в крови этих чашеобразных эритроцитов. Свое название - «стоматоцит» - клетки получили от греческого слова, означающего рот.
Когда влияние агента, вызывающего стоматоцитарную трансформацию, велико, то клетки по форме приближаются к сфере с небольшой ямочкой вместо рта и называются стомато-сфероциты.
Последовательность фаз обратимой трансформации дискоцит-стоматоцит Процесс начинается со сглаженности контура дискоцита с одной стороны, с другой - клетка остается вогнутой. В области углубления формируется везикулярное образование, разделяющее периферическую и оставшуюся слегка вогнутой центральную часть до тех пор, пока клетка не становится сферической формы. Ямки, наблюдаемые на электронной микрофотографии, при срезе представляют собой везикулярные образования. Трансформация дискоцит-стоматоцит обратима до стадии потери мембранного вещества. Как и в случае трансформации дискоцит-эхиноцит недостаток мембранного вещества не позволяет сохранять высоким соотношение площади мембранной поверхности к объему.
Агенты, вызывающие трансформацию дискоцита в стоматоцит, установлены. Ими являются либо непроникающие анионы, либо катионные амфиофилы. Гипотетически связывают стоматоцитогенные эффекты непроникающих анионов с их способностью изменять трансмембранный градиент рН. Следует заметить, что как определенная концентрация стоматоцитогенного или эхиноцитогенного агента, так и специфический рН ведут к гетерогенным изменениям формы в популяции эритроцитов, что указывает на определенную роль исходного состояния мембраны в специфике внутренних факторов.
Низкий уровень рН и наличие стоматоцитогенных агентов могут ингибировать кальциевый насос и вызывать характерные изменения формы клеток по кальций зависимому механизму. Блокада кальциевого насоса может приводить либо к перераспределению, либо к локальному накоплению кальция, или изменить взаимодействие мембраны с кальцием с последующей трансформацией в стоматоцит. Очевидно, что эхино- и стоматоцитогенные агенты не могут действовать в одних и тех же участках мембраны, но оба вида трансформации могут накладываться один на другой.
Эритроцитарный белок спектрин, расположенный на внутренней поверхности интактной мембраны клетки, имеет несколько типов участков связывания кальция. Изменение формы клетки можно объяснить агрегацией спектрина, вызванной кальцием, и связанное с этим изменение конфигурации и площади мембраны.
Оба эти пути трансформации дискоцита, как в эхиноцит, так и в стоматоцит имеют в финале превращение дискоцита в сфероцит и не обусловлены патологией самой клетки. Изменения эритроцитов, связанные с патологией клетки Акантоцит. Это особенная форма эритроцита при наследственном отсутствии (3-липопротеина. Для акантоцитов характерна форма, видимая при сканирующей электронной микроскопии. Клетка имеет редко расположенные хаотичные выросты с шишечкой на конце. Это необратимая форма, так как связана не с патологией плазмы крови, а с патологией самой клетки. Кодоцит (мишеневидные клетки). Эритроцит в форме колокола. Часто эти клетки бывают тонкостеночными и не следует их путать с тонкостеночным стоматоцитом. Такое колоколообразное изменение формы связано с патологией молекулы гемоглобина. Концентрация гемоглобина в этих клетках снижена. М. Везз эти клетки сравнивает с конвертом, который велик для содержащегося в нем гемоглобина. Устойчивость кодоцитов к гипотоническому раствору повышена и их лизис возможен только тогда, когда мембрана максимально истончена. Они как бы являются антиподом сфероцита, у которого мембрана мала для внутриклеточного содержимого. В мазке кодоциты выглядят как мишени. Кодоциты или мишеневидные клетки выявляются при гипохромных анемиях. Дакриоцит. Эритроциты каплевидной формы. Неясно, что вызывает образование таких клеток. Они встречаются при талассемии, лейкемии, интоксикации и гемолитической анемии. Дрепаноцит. Клетки в виде серпа встречаются при наследственной патологии. Элептоцит. Эритроциты овальной формы. Степень изменения правильного круга к овалу может быть различной. Они встречаются при острой анемии - единичные. При врожденном элептоцитозе все клетки имеют овальную форму. Они похожи на эритроциты верблюда, но в отличие от последних не имеют повышенной устойчивости к осмотическому гемолизу. Каротоциты ишизоциты. Разорванные клетки. Появление в крови кератоцитов связано с прохождением эритроцитов с большой скоростью через сосуды с признаками обструкции илисосуды, сдавленные извне.
Кератоциты и шизоциты сопутствуют сосудистой и кар-диальной патологии. Сфероцит. Клетки, описываемые как сферы, включают в себя различные по этиологии и морфологии эритроциты. Они имеют только одно общее свойство - истончение. Сегодня различают:
1) макросфероциты,
2) эхино-сфероциты и стомато-сфероциты - это клетки с объемом нормального эритроцита,
3) микросфероциты,
4) сфероциты при врожденном сфероцитозе.
Все патологические формы эритроцитов могут также трансформироваться по пути эхиноцита или стоматоцита. Изменения эритропоэза в условиях гиподинамии Моделирование условий гиподинамии в условиях замкнутого пространства проводилось на базе экспериментального комплекса ГНЦ РФИМБП. Продолжительность эксперимента была 135сут, в нем участвовало три испытателя в возрасте 31 -37 лет. На протяжении всего эксперимента концентрация гемоглобина и количество эритроцитов колебались незначительно. Наибольшим колебаниям подвержены такие два взаимосвязанных параметра, как площадь эритроцитов и количество ретикулоцитов. Изменения этих показателей становятся достоверными уже к 31-м суткам эксперимента. Известно, что размер эритроцитов связан с возрастом этих клеток - чем моложе эритроцит, тем больше его размер. Выявленное снижение количества ретикулоцитов и средней площади эритроцитов наблюдалось на протяжении всего эксперимента. Полученная нами динамика изменений эритроцитов свидетельствовала об умеренном, недостоверном снижении в периферической крови «молодых» эритроцитов и ретикулоцитов, что может быть объяснено как адаптивное торможение эритропоэза. Гиподинамия замкнутого пространства ведет к меньшему потреблению кислорода тканями, что приводит к снижению продукции эритроцитов, т. е. устанавливается уровень эритропоэза, необходимый для данных условий.
Результаты исследования свидетельствуют о том, что длительное пребывание в эксперименте, моделирующем замкнутое пространство (135 сут), приводит к изменениям метаболизма эритроцитов и состояния их мембраны. На 8-е сутки эксперимента выявлено статистически достоверное повышение содержания восстановленного глутатио-на и 2,3-дифосфоглицерата (2,3-ДФГ). На 22-е сутки была обнаружена тенденция к увеличению уровня АТФ на фоне снижения интенсивности энергообразующего процесса гликолиза, активности лак-татдегидрогеназы (ЛДГ), глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (Г-6-ФГ). При этом на высоком уровне остается содержание 2,3-ДФГ.
На 36-е сутки эксперимента статистически достоверные изменения наблюдались при определении активности ЛДГ и Г-6-ФГ, которые оставались сниженными на 40,8 и 20,9% соответственно. Аналогичные изменения были отмечены и на 85-е сутки. Наиболее существенные изменения метаболических параметров в эритроцитах наблюдали на 113-е сутки эксперимента, уменьшение АТФ на 38%, активности Г-6-ФД - на 28,8%.
При изучении липидного состава мембраны эритроцита выявлено снижение содержания фосфолипидов (ФЛ) на протяжении всего эксперимента и восстановительного периода. При этом статистически достоверное уменьшение ФЛ (на 30%) наблюдали на 113-е сутки.
Содержание холестерина существенно не изменялось на протяжении всего эксперимента и увеличивалось на 6-е и 14-е сутки восстановительного периода.
Снижение ФЛ приводит к увеличению коэффициента ХС/ФЛ, что может свидетельстовать об изменении фазового состояния мембраны: снижение степени ее «текучести» и повышение ее жесткости.
При растровой электронной микроскопии эритроцитов хотя и выявлялись трансформированные формы на 22-е, 113-е сутки гиподинамии и 1-е сутки реадаптационного периода, однако это были эхи-ноциты I и II стадий, способные к обратной трансформации в дискоциты. На 6-е и 14-е сутки восстановительного периода наблюдали нормализацию в липидной композиции мембран и в картине распределения эритроцитов по форме, что указывает на отсутствие изменений клинической значимости. Изменения эритропоэза в условиях гипокинезии Эксперимент, моделирующий условия гипокинезии, проводился с участием восьми женщин-добровольцев в возрасте 25-37 лет. Обследуемые находились на строгом постельном режиме с опущенным головным концом в течение 120 сут и были разделены на две группы (А и Б). В группе А проводились строго дозированные физические тренировки. Такая экспериментальная модель симулирует картину перераспределения крови в организме с облегчением венозного возврата крови к сердцу и ухудшением условий венозного оттока от головы. Результаты исследования обмена железа показывают, что гипокинезия вызывает развитие железодефицитной анемии в обеих группах женщин, причем в первую очередь снижается ферритин сыворотки и повышается общая железосвязывающая способность сыворотки. Полученные результаты при изучении обмена железа согласуются с данными по морфометрическому исследованию эритроцитов. Так, при антиортостатическом положении тела популяция эритроцитов характеризуется увеличением площади клетки за счет снижения количества клеток малого размера и увеличением процентного содержания крупных эритроцитов. Это свидетельствовало об изменении соотношения в популяции циркулирующих эритроцитов в сторону более молодых форм, т. е. о стимуляции гемопоэза. Вся динамика изменения площади эритроцитов в ходе данного эксперимента говорит об укорочении жизни этих клеток в периферическом русле в условиях гипокинезии.
Выявлено, что условия длительной антиортостатической (АНОГ) и раннего восстановительного периода приводят к сдвигам метаболических структурных параметров эритроцитов, следствием которых является изменение функционального состояния эритроцитов, проявляющееся в деформируемости и появлении эхиноцитоза. Используемые средства профилактики (физическая нагрузка и комплекс пищевых добавок с включением полиненасыщенных жирных кислот и антиоксидантов) оказывают благоприятное воздействие, снижая выраженность наблюдаемых изменений.
Направленность изменений была одинаковой у обеих групп, однако наиболее выражены эти изменения были в группе Б. В этой группе отмечена тенденция к снижению АТФ на 59-е и 115-е сутки и статистически достоверное повышение этого же показателя на 1 -е сутки восстановительного периода.
Выявленные изменения текучести мембран эритроцитов коррелируют со сдвигами в составе липидов, на что указывает снижение холестерина и увеличение фосфолипидов на протяжении всего эксперимента, а также существенное повышение холестерина в восстановительном периоде. Соотношение содержания липидных фракций (ХС/ФЛ), как и фосфолипидных (СМ/ФЛ), во время эксперимента снижалось и возрастало в восстановительном периоде. Это, вероятно, и обусловило обнаруженное увеличение «текучести» мембран во время АНОГ и снижение этого параметра в восстановительном периоде, поскольку известно, что «текучесть» мембраны зависит от содержания холестерина, фосфолипидов, белковых компонентов и спектра жирных кислот.
Выявленные сдвиги в липидной композиции мембран и как следствие изменение фазового состояния мембраны, по всей вероятности, могут быть причиной снижения функциональной активности эритроцитов. Об этом же свидетельствуют исследования показателей, ответственных за поддержание обычной формы эритроцитов и нормальной способности их к деформируемости.
Исследования формы эритроцитов не выявили существенных различий во время АНОГ. Соотношение определенных форм эритроцитов не выходило за пределы нормальных цифр. Исключение составляет небольшой эхиноцитоз. При этом в группе А он равнялся 14%, а в группе Б - 10%. Кроме того, в группе А эхиноциты находились в I и II стадиях трансформации, а в группе Б - только в I стадии.
Таким образом, гемореологические расстройства у больных с тяжелой травмой и кровопотерей были тесно связаны с нарушением реологических свойств крови. Выраженное и стойкое снижение деформабильности характеризовало тяжесть состояния больных и явилось неблагоприятным прогностическим признаком. Гемодилюция полностью не устраняла указанные нарушения, напротив, более выраженные изменения реологических свойств крови наблюдали у пациентов, имевших низкие значения гематокрита (ниже 0,30 (лмоль/л). Ишемическая болезнь сердца У больных ИБС II и III стадии наряду с ухудшением деформабильности, отмечается появление уплощенных эритроцитов более крупных размеров свыше 8 мкм в диаметре. Количество дискоцитов снижается на 63% и в среднем составляет 47,98±4,1%. Повышение при ИБС холестерина в плазме и отложение его в мембране эритроцитов способствуют уплощению эритроцитов и их трансформации по эхиноцитарному пути. Выявленная трансформация эритроцитов включает в себя все стадии до сфероцитов. Кроме того, у больных ИБС про-исходитувеличение ^трансформированных форм: книзоциты и сфе-роциты увеличивались в 4,7 раза, что в среднем соответствовало 1,67±0,2% и 3,… Продолжение »
|
